动力蛋白,基因丝,中间链4

DNAI4 是一种纤毛特异性蛋白,对纤毛跳动至关重要( Zhang et al., 2019 )。

▼ 克隆与表达

通过数据库分析,张等人(2019)将 DNAI4(他们称为 WDR78 )鉴定为衣藻 Ic138 的脊椎动物直系同源物。他们克隆了小鼠 Wdr78,它编码一种 807 个氨基酸的蛋白质,在其 N 和 C 末端分别与衣藻 Ic138 具有 31% 和 40% 的同一性。Wdr78 和 Ic138 在它们的 C 末端都有 5 个 WD40 基序。定量 RT-PCR 显示小鼠 Wdr78 在含有活动纤毛的组织中高度富集,包括气管、肺、输卵管和睾丸。Wdr78 mRNA 在小鼠气管上皮细胞(mTECs) 中的表达与多纤毛发生密切相关,并显示出类似于其他轴索动力蛋白亚基的模式(例如,WDR63;617968)。免疫染色显示 Wdr78 特异性定位于 mTECs 多纤毛的轴突,但在 NIH3T3 细胞的初级纤毛中未检测到 Wdr78。

▼ 测绘

Gross(2021)基于 DNAI4 序列(GenBank BC126379 ) 与基因组序列(GRCh38)的比对,将 DNAI4 基因对应到染色体 1p31.3 。

▼ 基因功能

Hendrickson 等人使用交联技术(2013)表明莱茵衣藻 Ic138 和 Ic140 直接与 α-微管蛋白(见602529)和 β-微管蛋白(见191130)结合。Ic138 是衣藻中 Ic140 和微管蛋白相互作用所必需的。

通过免疫沉淀分析,Zhang 等人(2019)表明小鼠 Wdr78 与内部动力蛋白臂-f(动力蛋白-f) 亚基相关,包括 Wdr63 和 Dnah2( 603333 )。小鼠室管膜细胞中 Wdr78 的消耗表明 Wdr78 是动力蛋白-f 组装和纤毛跳动所必需的。

▼ 动物模型

张等人(2019)发现斑马鱼中 wdr78 的敲低导致纤毛病相关表型,包括弯曲体、脑积水、前肾囊肿或耳石异常以及左右不对称。显微镜分析表明,敲除的斑马鱼morphants还表现出麻痹的前肾纤毛和脊髓纤毛的异常跳动。