地西泮结合抑制剂

苯二氮卓类药物调节 A 型 GABA（γ-氨基丁酸）受体的信号转导（ 137160） 位于脑突触中。GABA 是哺乳动物中枢神经系统的主要抑制性神经递质。该受体以高亲和力和氯离子通道结合 GABA、β-咔啉和苯二氮卓类药物。苯二氮卓类药物延长由 GABA 引起的氯离子通道开放爆发，从而增强 GABA 介导的抑制反应。这种促进在减少病理性焦虑方面发挥着作用。已鉴定出一种内源性配体，它被位于 GABA 受体中的 β-咔啉/苯二氮卓识别位点识别。这种配体，地西泮结合抑制剂（DBI），是一种约 11 kD 的蛋白质，可在体外置换与脑膜组分结合的 β-咔啉和苯二氮卓类。DBI 或衍生的小神经肽被认为可以下调 GABA 的作用（总结来自格雷等人，1986 年）。

▼ 克隆与表达

格雷等人（1986）分离了一个编码人类 DBI 的 cDNA 克隆。一种与 DBI 相关的多肽，与地西泮具有相似的结合活性，已从人类和牛脑中分离出来。这种称为内西平的蛋白质含有 86 个氨基酸残基。韦伯等人（1987）从牛和人文库中克隆了内西平 cDNA，发现牛和人形式的编码区有 93% 的同源性。该消息长 650 个核苷酸。使用克隆的 cDNA 进行的 Northern 分析表明，除了大脑之外，该信息还在心脏、肝脏和脾脏中表达。

地西泮结合抑制剂也称为酰基辅酶 A 结合蛋白（ACBP）。罗斯等人（1992）从出芽酵母酿酒酵母中克隆了同源基因。酵母基因不含内含子，编码 87 个氨基酸（包括起始蛋氨酸）的多肽，长度与人类基因产物相同，氨基酸残基保守率为 48%。最高度保守的结构域包含 7 个连续的残基，这些残基在来自酵母、鸟类和哺乳动物的所有已知蛋白质物种中都是相同的。该结构域构成酰基辅酶A酯的疏水结合位点，位于分子的第二个螺旋区域内。酵母等原始生物中高度保守基因的存在支持了其作为酰基辅酶A结合蛋白的基本生物学作用，并表明在高等生物中归因于它的许多生物学功能可能源于它与酰基相互作用的能力。 -辅酶A。罗斯等人（1992）指定酵母基因 ACB，用于酰基辅酶 A 结合。

▼ 基因功能

已在外周组织中鉴定出与 GABA 受体复合物无关且与中枢神经系统相关的苯二氮卓受体不同的苯二氮卓受体。安霍尔特等人（1986）提出的证据表明这些外周受体位于线粒体外膜上。韦伯等人（1987）推测内西平在外周组织中的作用是与该受体相互作用。

赫齐格等人（1996）从猪和大鼠肠粘膜中分离出胰蛋白酶敏感的胆囊收缩素（CCK；118440 ） 释放肽（CCK-RP）。与此同时，Spannagel 等人（1996）从大鼠肠道分泌物中纯化了一种管腔 CCK 释放因子。赫齐格等人（1996）发现 CCK-RP 的氨基酸序列与地西泮结合抑制剂的氨基酸序列相同。李等人（2000）证明 DBI 介导胰腺分泌的反馈调节和胆囊收缩素的餐后释放。

▼ 测绘

通过人-鼠杂交细胞系的原位杂交和Southern印迹分析，DeBernardi 等人（1988）将 DBI 基因定位到 2q12-q21。通过原位杂交，在其他染色体上观察到二次信号，主要是 nos。5、6、11和14。细胞杂交研究表明3个同源序列在其他染色体上。

Todd 和 Naylor（1992）使用记录在 GenBank 数据库中的 DBI 基因的核苷酸序列来生成 DNA 引物，以通过 PCR 扩增特定序列。当用于分析含有人类 2 号染色体的微细胞杂交克隆时，引物无法扩增 DNA 序列。因此，为了绘制基因图谱，通过 PCR 分析了一组体细胞杂交体。该实验的结果将 DBI 置于人类 6 号染色体上。只有当区域 6q12-q21 存在时，杂交细胞才含有 DBI 基因。

Gersuk 等人（1995）克隆并测序了 ACBP/DBI 的假基因。该基因座称为 DIBP1，定位于 6 号染色体。作者得出结论，该功能基因必须位于 2 号染色体上。