前血小板碱性蛋白
前血小板碱性蛋白(PPBP) 是 2 种血小板 α 颗粒蛋白、血小板碱性蛋白(PBP) 和结缔组织激活肽 III(CTAP3) 的前体。血小板活化后,它们被释放并在血浆中进一步加工成 β-血栓球蛋白(TGB) 和中性粒细胞激活肽 2(NAP2)。
▼ 克隆与表达
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通过从血小板颗粒中纯化具有抗菌活性的蛋白质,然后进行阳离子交换色谱、连续酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳、质谱和 N 端测序,Krijgsveld 等人(2000)将凝血素 TC1 和 TC2 分别鉴定为 PPBP 的 NAP2 和 CTAP3 形式的变体。TC1 和 TC2 与 NAP2 和 CTAP3 的不同之处在于 C 端截断 2 个氨基酸(ala 和 asp)以及它们的杀菌和杀真菌特性,这显然不涉及孔形成。
▼ 基因功能
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CTAP3 是一种血小板衍生的生长因子,可在人成纤维细胞培养物中刺激多种特定的代谢和细胞活动,包括有丝分裂、细胞外基质合成、葡萄糖代谢和纤溶酶原激活剂合成(Castor 等人,1983 年;Castor 等人,1985 年))。
使用质谱法,Aivado 等人(2007)生成了 122 名骨髓增生异常综合征(MDS) 患者、72 名非 MDS 患者和 24 名对照者的血清蛋白质组谱,并确定了一种将 MDS 与非 MDS 血细胞减少症区分开来的谱。肽质量指纹图谱和四极杆 SELDI-TOF 质谱鉴定了 2 个差异蛋白,CXCL4(PF4) 和 CXCL7,这两种蛋白都显着降低了 MDS 中的血清水平。孤立抗体检测证实了这种降低,亚型分析显示晚期 MDS 中这 2 种蛋白质的血清水平降低。艾瓦多等人(2007)表明在晚期 MDS 中这些趋化因子的转录或翻译可能存在协同干扰。
▼ 基因结构
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Majumdar 等(1991)比较了 β-血栓球蛋白和血小板因子 4(PF4; 173460 )。TGB 基因长 1,139 bp,与小诱导基因(SIG) 家族的其他成员一样,它分为 3 个外显子。
▼ 测绘
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通过人/仓鼠体细胞杂交体的 PCR 分析,Majumdar 等人(1991)证明 TGB 基因与 PF4 基因一样,位于 4 号染色体上。基因组 DNA 的 Southern 印迹分析表明,与 PF4 基因一样,人类基因组中存在多个 TGB 基因拷贝。温格等人(1991)通过原位杂交将 CTAP3 基因定位到染色体 4q12-q13。
Tunnacliffe 等(1992)指出所有 CXC SIG 都对应到 4 号染色体。通过脉冲场凝胶电泳(PFGE),Tunnacliffe 等人(1992)证明 TGB 基因(重复)与重复的 PF4 基因和其他先前映射的 CXC SIG 密切相关,即 IL8( 146930 )、GRO1( 155730 )、GRO2( 139110 ) 和 GRO3( 139111) ),位于条带 4q12-q13 中的单个 700-kb 限制性片段上。唯一与该簇无关的 CXC SIG 是编码 γ-干扰素诱导的 10-kD 蛋白(SCYB10;147310),它位于 4q21 条带中。通过对 lambda 基因组克隆的分析,Tunnacliffe 等人(1992)证明 TGB1 和 PF4 基因相隔不到 7 kb,而 TGB2 和 PF4 替代(PF4V1; 173461 ) 基因相隔约 5 kb。在每个 TGB/PF4 重复中,TGB 样基因位于其连锁 PF4 样基因的上游。这种紧密连接的复合体中的基因以巨核细胞特异性方式表达。
通过 YAC 克隆的 PCR 分析和作图,O'Donovan 等人(1999)将许多 CXC 趋化因子基因定位到 4q12-q21。他们建议,在这个区域的顺序是着丝粒- IL8 - GRO1 / PPBP / PF4 - SCYB5(600324)/ SCYB6(138965) - GRO2 / GRO3 - SCYB11(604852) - SCYB10 - MIG(601704 )--端粒。