包含卷曲螺旋结构域的蛋白质 66

CCDC66 是一种微管结合蛋白，可作为中心体和纤毛蛋白的靶向因子（Conkar 等，2017）。

▼ 克隆与表达
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通过数据库分析，Dekomien 等人（2010）确定了人类、小鼠和狗 CCDC66。预测的人类 CCDC66 蛋白包含 914 个氨基酸，并具有至少 1 个卷曲螺旋结构域。各种框内起始密码子和选择性剪接有可能在人类、小鼠和狗中产生各种 CCDC66 亚型。EST 数据库分析表明 CCDC66 在人类中广泛表达，RT-PCR 分析在所有检查的小鼠组织中检测到 Ccdc66 转录物。免疫组织化学分析显示 CCDC66 在人、小鼠和狗的视网膜中表达。使用还原剂进行的蛋白质印迹分析显示，Ccdc66 通过小鼠视网膜中的二硫键形成二聚体。

Gerding 等人使用定量蛋白质印迹分析（2011）表明 Ccdc66 从出生后第 1 天到成年在小鼠中表达。Ccdc66 蛋白主要分布在视网膜的发育杆外节段。

康卡等人（2017）报道人类 CCDC66 包含 2 个卷曲螺旋结构域，CC1 和 CC2，以及一个进化上保守的 CCDC66 结构域，其中一部分与 CC2 重叠。RPE1 人视网膜色素上皮细胞的免疫荧光分析表明，CCDC66 在整个细胞周期中动态定位于中心体或中心体卫星和初级纤毛。CCDC66 定位于中心体和卫星需要 1 个以上的结构域。

▼ 基因结构
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德科米恩等人（2010）确定 CCDC66 基因包含 19 个外显子，跨度约为 64.6 kb。

▼ 测绘
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通过数据库分析，Dekomien 等人（2010）将 CCDC66 基因定位到 3 号染色体。

Gross（2021）基于 CCDC66 序列（GenBank BC047509 ）与基因组序列（GRCh38）的比对将 CCDC66 基因定位到染色体 3p14.3 。

▼ 基因功能
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使用体外和体内检测，Conkar 等人（2017）证明 CCDC66 直接与微管相互作用。CCDC66的1个以上结构域介导了相互作用，只有全长蛋白才能通过捆绑改变微管网络的组织。CCDC66 的过表达破坏了中心粒卫星的组织并抑制了初级纤毛的形成，因为 CCDC66 通过诱导微管束形成破坏了中心粒卫星组织。免疫沉淀实验表明，CCDC66 与中心卫星蛋白 CEP290（ 610142 ）和 PCM1（ 600299 ）相互作用。）。击倒分析表明 CCDC66 是有效的纤毛发生和中心粒卫星分布所必需的，并且 CCDC66 调节 BBS4（ 600374 ）向纤毛的募集，并且是纤毛发生过程中 BBS4 从中心粒卫星到初级纤毛的重新定位所必需的。作者得出结论，CCDC66 通过充当中心体和纤毛蛋白的靶向因子在纤毛形成和转移中起作用。

▼ 动物模型
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在患有广泛性进行性视网膜萎缩（gPRA）的 Schapendoes 犬中，Dekomien 等人（2010）鉴定了 Ccdc66 基因外显子 6 中 A 的纯合插入，导致移码和过早终止密码子。与未受影响的狗相比，受 gPRA 影响的 Schapendoes 中的 Ccdc66 RNA 表达要低得多。受 gPRA 影响的 6 岁 Schapendoes 的视网膜显示出晚期视网膜变性的所有迹象。

格尔丁等人（2011）发现 Ccdc66 -/- 小鼠是可行的，并且以预期的孟德尔比率出生。然而，他们表现出早期、缓慢、进行性的视网膜变性。视网膜电图显示，视网膜功能障碍导致暗视 a 波振幅降低，从 1 个月到 7 个月时下降，以及 1 个月时明视 b 波早期减少，7 个月时略有改善。