碳酐酶 VI

碳酸酐酶(CA) 是一类锌金属酶。有关 CA 系列的背景信息,请参阅114800。

▼ 克隆与表达
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CA VI 是在唾液腺和唾液中发现的 42-kD 分泌型同工酶(Murakami 和 Sly,1987)。通过使用生化和免疫组织化学技术,Karhumaa 等人(2001)证明 CA VI 也是牛奶的基本成分。

奥尔德雷德等人(1991)分离并测序了编码 CA6 的 cDNA 克隆。这些克隆鉴定了一种 1.45 kb 的 mRNA,该 mRNA 在腮腺下颌下唾液腺中高水平存在,但在其他组织(如舌下腺、肾脏、肝脏和前列腺)中不存在。该 cDNA 编码了 308 个氨基酸的蛋白质,其中包括典型的分泌蛋白质的 17 个氨基酸的前导序列。与细胞质同工酶的 259 或 260 个残基相比,成熟的 CA VI 蛋白有 291 个氨基酸;大多数存在的额外氨基酸位于羧基末端区域。CA VI已显著在其结构从胞质同工酶,包括CA I(发散114800),CA II(611492),和CA III(114750),它们之间有着密切的联系。CA VI 蛋白与人类 CA II 具有 35% 的序列同一性,而参与酶活性位点的残基则得到了保守。人类 DNA 的 Southern 分析表明只有 1 个基因编码 CA VI。

撒切尔等人(1998)将gustin 鉴定为CA6。Gustin 包含 2 个潜在的 N 连接糖基化位点。通过RP-HPLC和SDS-PAGE,从人唾液中纯化的gustin在去糖基化之前具有37kD的分子量,在去糖基化之后具有33kD的分子量。

卡胡马等人(2001)表明,从人乳中纯化的 42-kD CA VI 糖多肽在蛋白质序列上与唾液 CA VI 具有 100% 同源性。他们发现它在人类初乳中的浓度大约是成熟乳中的 8 倍,后者对应于先前在人类唾液中检测到的水平。初乳中的高浓度,特别是它在酸性环境中的功能和结构稳定性,以及它在味蕾中的生长支持作用表明,牛奶 CA VI 是婴儿消化道正常生长和发育的重要因素。

▼ 测绘
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通过对体细胞杂交面板的 Southern 分析和原位杂交,Sutherland 等人(1989)将 CA6 基因定位到 1p36.33-p36.22。怀特等人(1998)通过研究酵母和 P1 人工染色体(YAC 和 PAC)重叠群,报道了 CA6、ENO1( 172430 ) 和 SLC2A5( 138230 ) 基因到 1p36 的物理定位。来自重叠群的 PAC 通过荧光原位杂交被定位到 1p36.2。