GPI 后附着于蛋白质 6

PGAP6 是一种细胞表面磷脂酶 A2，可选择性处理某些糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚定蛋白，包括 CRIPTO（TDGF1; 187395 ）（ Lee 等人，2020 年）。

▼ 克隆与表达
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本桥等人（2000）克隆了小鼠和人类 PGAP6，他们将其命名为 M83。全长人 M83 包含 771 个氨基酸，包括 28 个氨基酸的 N 端前导序列。成熟的 743 个氨基酸蛋白质的预测分子量为 82 kD，包括一个 514 个氨基酸的细胞外区域、一个 198 个氨基酸的区域，具有 5 个跨膜结构域，以及一个 31 个氨基酸的细胞质尾部。细胞外区域有 10 个推定的 N-糖基化位点，细胞外区域的膜近端部分富含半胱氨酸，并包含一个共有的 EGF（ 131530 ）样基序。细胞质区域具有推定的酪氨酸磷酸化位点。人类 M83 与其小鼠直向同源物具有 76% 的氨基酸同一性，与人类 NAG5 具有 37% 的同一性（TMEM8B；616888）。表位标记的人 M83 在转染的 COS7 细胞表面表达，可能是一种糖蛋白。Northern印迹分析在人和小鼠细胞系中检测到4.0-kb和2.9-kb的转录本。人体组织的 RT-PCR 分析显示 M83 在胰腺、胎盘、脾脏、肝脏、肾脏、骨髓、外周血白细胞和扁桃体中表达。在人类造血细胞中，M83 主要在外周血中 CD4（186940）阳性和 CD8（见186910）阳性静息 T 细胞中表达，在活化的 CD4 阳性和 CD8 阳性 T 细胞中表达下调。

李等人（2016）报道人类 PGAP6 包含一个 N 端信号序列、一个大 N 端域、一个用于内质网（ER）插入的 EGF 样域和 7 个 C 端跨膜域。流式细胞术分析显示PGAP6在NTERA2人胚胎癌细胞和HEK293T细胞表面表达。在 CHO 3B2A 细胞中表达的 PGAP6 显示出 2 条表观分子量为 120 和 90 kD 的条带，分别代表成熟细胞表面蛋白和带有未成熟 N-聚糖的蛋白。亚细胞分离和显微镜观察证实，120-kD 蛋白定位于质膜，90-kD 蛋白定位于内质网。

▼ 测绘
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通过 FISH，Motohashi 等人（2000）将 PGAP6 基因定位到染色体 16p13.3。他们将小鼠基因定位到染色体 17B1。

▼ 基因功能
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李等人（2016）发现 PGAP6 参与处理 GPI 锚定蛋白（GPI-AP），因为 PGAP6 的过表达显着减少了 CHO 3B2A 细胞表面的 GPI-AP 数量。CRIPTO，但不是其近亲 CRYPTIC（CFC1; 605194 ），对 PGAP6 高度敏感。通过 PGAP6 过表达，CRIPTO 的表面表达强烈降低，CRIPTO 的分泌增强，而 PGAP6 的敲低具有相反的效果。PGAP6 具有 GPI 特异性磷脂酶 A2 活性，PGAP6 加工 CRIPTO 并将其释放为含有溶血磷脂酰肌醇的形式，该形式被磷脂酶 D（GPLD1；602515）进一步切割。PGAP6 发布的 CRIPTO 作为 NODAL（ 601265）共受体并调节顺式和反式 NODAL 信号，PGAP6 表达也降低了细胞相关的 CRIPTO 活性。

使用 CRIPTO-CRYPTIC 嵌合蛋白，Lee 等人（2020）表明 CRIPTO 的 CFC 域，尤其是 C 端区域，决定了 CRIPTO 对 PGAP6 的敏感性。PGAP6 的 N 端结构域与 CRIPTO 的 CFC 结构域特异性相互作用，并将其与 CRYPTIC 的 CFC 结构域区分开来进行加工。PGAP6 对人类 GPI-AP 表现出狭窄的特异性，因为只有 CRIPTO、GPC3（ 300037 ）、前列腺素（PRSS8；600823 ）、SPACA4（ 609932 ）和 contactin-1（CNTN1；600016 ）对 PGAP6 敏感。将 PGAP6 转染到 GPI 转酰胺酶缺陷的 CHO 细胞中（参见311770）将 GPI 连接到蛋白质上，显示游离 GPI 水平降低了 88%。研究结果表明，当蛋白质部分不存在时，PGAP6 会访问 GPI，并且除了少数例外，大多数 GPI-AP 的蛋白质部分禁止 PGAP6 访问 GPI 部分。

▼ 动物模型
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李等人（2016）发现 GPI 生物合成基因 Pign（ 606097 ）和 Pgap1（ 611655 ）发生突变的小鼠显示出 Pgap6 依赖性 Cripto 分泌受损，这些基因具有缺陷的 Cripto 信号传导和全前脑畸形。Pgap6 -/- 小鼠在早期胚胎发育中存在缺陷，特别是在前后轴的形成方面，这表明 Pgap6 对 Cripto 功能至关重要，并调节小鼠胚胎中的前后轴形成。