N-α-乙酰转移酶 35,NatC 辅助亚基
N-末端乙酰化是真核细胞中最常见的蛋白质修饰之一。NAA35 是 NatC N-乙酰转移酶复合物的辅助亚基(Starheim 等,2009)。
▼ 克隆与表达
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易等人(2000)克隆了大鼠 Naa35,他们称之为 T4a。725 个氨基酸的大鼠 T4a 蛋白的计算分子量为 83.1 kD,并包含许多磷酸化和肉豆蔻酰化位点。EST 数据库分析揭示了人和小鼠中的 T4a 直向同源物。原位杂交显示 T4a 在大鼠角膜愈合和发育过程中以及成熟的角质形成细胞和大鼠皮肤毛囊中的强表达。
使用质谱分析,Polevoda 和 Sherman(2001)确定酵母 NatC N-α-末端乙酰转移酶包含 3 个亚基:Mak3(NAA30;617989)、Mak31(NAA38;617990)和 Mak10(NAA35)。数据库分析揭示了高等真核生物中所有 3 个亚基的潜在直系同源物。
通过在数据库中搜索假定的 NatC 复杂组件,Starheim 等人(2009)鉴定了人类 NAA35,他们称之为 MAK10。转染的 HeLa 细胞的免疫荧光分析表明 NAA35 几乎完全定位于细胞质。
▼ 测绘
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Gross(2021)基于 NAA35 序列(GenBank BC117427 ) 与基因组序列(GRCh38)的比对将 NAA35 基因定位到染色体 9q21.33 。
▼ 基因功能
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Polevoda 和 Sherman(2001)使用质谱分析表明,3 个酵母 NatC 亚基中的每一个都是蛋白质 N 末端区域乙酰化所必需的。删除酵母中 3 个 NatC 亚基中的任何一个都会导致相同的表型,包括缺乏 NatC 底物的乙酰化、生长减弱以及缺乏维持或组装 LA dsRNA 病毒颗粒。
使用共免疫沉淀分析,Starheim 等人(2009)表明,人 NAA35 与NatC 复合物中的 NAA30( 617989 ) 和 NAA38( 617990 ) 相互作用。NatC 复合物与核糖体颗粒共沉积,表明它参与了共翻译乙酰化。体外试验表明 NAA30 具有 N-乙酰转移酶活性,表明它是 NatC 复合物的催化亚基。小干扰NATC亚基,包括NAA35的RNA介导的敲低,导致p53蛋白(191170) -依赖性的细胞死亡和降低的人细胞系的生长。斯塔海姆等人(2009) 得出的结论是,NAA35 是 NatC 复合物的一个组成部分,它对于维持人类细胞中的蛋白质功能和细胞活力很重要。