肿瘤相关巨噬细胞高表达FLT3L 激活B-ALL细胞FLT3通路并促进其生存

2020年新型冠状病毒肺炎疫情全球肆虐，尽管如此，疫情并未阻挡学术的进步与传递。众多期待中，第62届美国血液学年会（ASH）将于2020年12月5日~8日以线上形式召开，公布多项重磅研究。其中，中山大学附属第七医院血液病研究团队的研究成果入选ASH口头发言，即将在国际舞台上发出响亮的声音。

通讯作者

第一作者

要点：

1. 受体型酪氨酸激酶FLT3表达量与B-ALL预后密切相关，B-ALL患者外周血FLT3L呈高水平；

2. B-ALL微环境中的肿瘤相关巨噬细胞高表达FLT3L，并激活微环境中B-ALL白血病细胞的FLT3信号通路；

3. 本研究为靶向FLT3L/FLT3信号通路在B-ALL的治疗研究提供思路和理论支持；

4. 2020美国血液学年会口头发言。

研究背景
B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）是B淋巴细胞分化早期形成的恶性血液病，在全部儿童癌症中占30%。几乎所用的B-ALL细胞异常表达受体型酪氨酸激酶FLT3，其在树突细胞和B淋巴细胞发育过程中起重要作用。在B-ALL中，FLT3的高表达显著增加患者复发/死亡的风险，表明了FLT3在B-ALL发生发展中的重要功能。值得注意的是，获得功能性FLT3突变在B-ALL中相对罕见（<5%），提示了激活FLT3的配体FLT3L在这类疾病中的关键作用。然而，FLT3L在B-ALL中的水平、细胞来源和功能尚不明确。

研究方法与研究结果
在该研究中，我们通过ELISA在28例B-ALL患者外周血浆中检测了FLT3L的水平，发现其在B-ALL中（234.7 ± 47.6 pg/ml）显著高于健康对照组（41.2 ± 15.5 pg/ml）。在被检样本中，12例患者已经达到完全缓解，其微小残留病变（MRD）呈阴性，但外周血浆仍维持高水平FLT3L（286.9 ± 71.2 pg/ml），提示了B-ALL患者的高水平FLT3L并非来自白血病细胞自分泌。我们认为B-ALL白血病微环境中的肿瘤相关巨噬细胞表达FLT3L，因为研究已证实激活的巨噬细胞能够在自身免疫疾病患者体内高表达FLT3L，从而促进炎症反应和局部关节破坏。在之前的研究中，我们通过培养慢性淋巴细胞白血病（CLL）的外周血单个核细胞（PBMCs）得到了具有M2特征的肿瘤相关巨噬细胞（Chen Y, et al. Blood. 2019; 134:1084-1094.）。这些细胞是CLL微环境中的重要成分，有着支持恶性B细胞生存和迁移的作用。在本研究中，我们使用类似的方法培养B-ALL患者的外周血单个核细胞，得到了形态类似的肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）。这些细胞呈CD68/CD163阳性，是典型的M2巨噬细胞。我们分别提取了相同患者来源的B-ALL细胞和TAMs的RNA并检测了FLT3L转录水平，发现FLT3L的转录本在TAMs的RNA中呈高水平，在B-ALL细胞中检测不到（N = 5）。我们分析了培养TAMs和B-ALL细胞培养基中的分泌型FLT3L的浓度，发现培养TAMs的培养基中FLT3L水平远高于B-ALL细胞组。我们进行了细胞共培养实验，通过流式细胞术发现与TAMs共培养的B-ALL细胞的活细胞比率显著高于单独培养的B-ALL细胞。免疫印迹实验发现与TAMs共培养的B-ALL细胞的FLT3和ERK磷酸化显著上调，表明了共培养B-ALL细胞中FLT3信号通路的激活。

研究结论
通过上述研究，我们认为B-ALL患者中上调的FLT3L主要来自微环境中的TAMs。如此高浓度的FLT3L可能参与微环境中B-ALL细胞产生耐药性的机制。在临床上使用阻断FLT3信号通路的靶向治疗可能逆转B-ALL细胞的耐药性，从而增强化学疗法对白血病细胞的杀伤效果。

参考文献
https://ash.confex.com/ash/2020/webprogram/Paper142093.html