肠癌免疫治疗与肿瘤免疫微环境
编者按：以线上形式举行的欧洲肿瘤内科学会（ESMO）2020年会上，众多中国研究被接受以电子壁报形式展示。本文选取探讨肠癌免疫治疗以及肿瘤免疫微环境方面的四项中国学者的研究，与读者分享。
结肠癌在肿瘤免疫微环境和临床结果方面的差异（摘要号498P）
位于右侧和左侧的结直肠癌分别称为右结肠癌（RCC）和左结肠癌（LCC）。越来越多的证据表明，RCC和LCC在生理和分子特点方面具有不同的特征，并且两者在治疗策略和预后方面也不同。然而，并没有足够的数据从肿瘤免疫微环境的角度解释这些差异。因此，昆明医科大学附属第一医院的Z. Wen等评估了肿瘤微环境的免疫状态，从而去解释LCC和RCC之间的差异，并从免疫微环境探讨结直肠癌的预后。
收集从2017年5月至2018年12月期间的50例结直肠癌患者的组织样本，应用Dako PD-L1 IHC 22C3 pharmDx检测PD-L1的表达，采用多重荧光免疫组织化学法（mlCH）检测肿瘤活检组织中CD8 + T细胞、肿瘤相关巨噬细胞（TAM）的两种亚型以及NK细胞的两种亚型。分析这些患者的随访数据。使用GraphPad Prism（7.01版）和SPSS 21.0版（SPSS, Inc）进行统计分析。
在结直肠癌患者（n=50）的瘤内和肿瘤边缘均发现CD56bright NK和CD56dim NK细胞、M1和M2 TAM、CD8 + T细胞。RCC较LCC肿瘤组织中的CD8 + T细胞和TAM更多，而仅NK细胞特别是CD56dimNK细胞在RCC肿瘤中的浸润少于LCC（P<0.01）。CD56dim NK细胞浸润较多的患者预后较好，即无进展生存期更长（P<0.005）。此外，在所有患者的肿瘤组织中均未检测到PD-L1阳性表达（肿瘤比例评分，TPS<1%）。
结论
本研究再次证明LCC的预后好于RCC，并且研究发现LCC较RCC中有更多的CD56dim NK细胞浸润，RCC较LCC中有更多的CD8 + T细胞和TAM（M1和M2）浸润。除PD-1/PD-L1外，在结直肠癌中还应探索其他免疫逃逸机制，CD56dim NK细胞浸润应被认为是结直肠癌更有价值的预后生物标志物。
探索KMT2C/KMT2D突变与结直肠癌（CRC）中免疫检查点抑制剂（ICI）之间的潜在关系（摘要号497P）
KMT2C和KMT2D通常形成复合体，负责H3K4的甲基化。根据本研究作者北京大学国际医院C. Miao等先前的结果，CRC的KMT2C/2D突变通常伴有DNA损伤修复基因突变和微卫星不稳定性高（MSI-H），而二者均报告与免疫疗法密切相关。研究者假定，KMT2C/2D突变可能引起CRC（结直肠癌）的基因组不稳定，并可能预测ICI（免疫检查点抑制剂）的疗效。因此，本研究调查KMT2C/2D突变与免疫治疗之间的关系，并且分析了ICI对KMT2C/2D突变患者的潜在的临床益处。
应用研究作者所在中心北京大学国际医院的CRC队列（n=2824）和DFCI（丹娜法伯癌症研究所）（Cell Reports 2016）（n=619）的CRC队列数据分析MSI状态，应用MSKCC（纪念斯隆—凯特琳癌症中心）ICI（Nat Genet 2019）队列（n=110）的 CRC数据评估肿瘤突变负荷（TMB）和总生存（OS）。应用t检验比较KMT2C/2D突变体（MT）与野生型组（WT）的特征。OS分析采用Kaplan-Meier分析/log-rank检验。
在北大国际医院队列中，KMT2C/2D MT（突变体）组的49%（32/65）中观察到了MSI-H（微卫星不稳定性高），而在WT组，仅有7%（99/1376）观察到MSI-H。同样，在DFCI组，MT（突变体）组的47%（55/118）中发现MSI-H，而WT组仅有9%（36/411）。两个队列都证明，KMT2C/2D和MSI-H的变异密切相关，提示KMT2C/2D突变与较高的基因组不稳定性之间存在潜在相关性。进一步分析MSKCC ICI队列，结果发现，在KMT2C/2D MT组和WT组（R2=0.5527，95%CI：-73.8~-35.63，P<0.0001）之间，TMB（肿瘤突变负荷）得分中位数（69.08 vs. 14.37）差异很大。在KMT2C/2D MT和WT组（HR 0.46，95%CI：0.24~0.88，P<0.05），中位OS差异很大（34个月 vs. 13个月）；结果支持KMT2C/2D突变与较高的TMB、OS和ICI治疗有关。
结论
本研究发现KMT2C/2D突变与MSI-H和更高的TMB紧密相关。KMT2C/2D突变的CRC患者可从ICI治疗中受益。进一步的前瞻性研究需要综合考虑KMT2C/2D突变、MSI-H和TMB，这些都可能有助于ICI的临床效益。
大肠癌不同的基因突变与各种类型的肿瘤免疫微环境紧密相关（摘要号481P）
为更好地指导免疫检查点抑制剂（ICI）的临床应用并选择更多适合ICI治疗的CRC患者，评估肿瘤免疫微环境（TIME）是一个适用的方向。昆明医科大学附属第一医院C. Shi等评估了CRC TIME的特征，并尝试建立基因突变与TIME之间的关联，从而预测不同CRC患者的TIME类型，进而判断适合ICI治疗的CRC患者。
从2019年12月开始收集30例CRC患者的肿瘤组织样本，通过多种荧光免疫组织化学方法（mICH）评估包括CD8 + T细胞、M1/M2型肿瘤相关巨噬细胞（TAM）和浸润在肿瘤组织中的两种亚型NK细胞在内的几种免疫细胞，使用Dako PD-L1 IHC 22C3 pharmDx检测PD-L1的表达，并通过下一代测序（NGS）检测基因突变。在IBM SPSS statistic 21中应用卡方检验、t检验。
NGS检测显示，这些样本中的主要突变是APC（14/20，70％）、KRAS（13/20，65％），NRAS（7/20，35％）、PIK3CA（3/20，15％）、ARID1A（2/20，10％）、SMAD4（4/20，20％）、FBXW7（3/20，15％）等。所有样本均带有PD-L1的阴性表达。在这些样本（n=20）的肿瘤内区域和肿瘤边缘都发现了CD8 + T细胞、M1和M2 TAM、CD56brightNK和CD56dimNK细胞，进一步的分析显示不同基因突变样本中的TIME类型各不相同，详细而言，具有NRAS突变的样本中浸润的M1/ M2巨噬细胞和CD56bright NK细胞比NRAS野生型的更多（P<0.05）；具有SMAD4突变的样本中浸润的CD8 + T细胞和M2巨噬细胞比SMAD4野生型更多（P<0.05）。与野生型相比，具有PIK3CA突变的样本中浸润的M2巨噬细胞更多，浸润的CD8 + T细胞更少（P<0.05）。
结论
几乎所有PD-L1阴性表达的CRC肿瘤免疫巨噬细胞都暗示CRC肿瘤微环境中存在其他免疫检查点，不同的突变会导致CRC的TIME类型不同，这提示可以使用不同的基因突变来预测TIME的类型，并用以判断和确定免疫检查点抑制剂治疗的潜力。
关于细胞因子介导的诱导杀伤细胞疗法在结肠癌辅助治疗中的效果分析（摘要号418P）
在过去十年里，基于细胞的免疫治疗已被报道可通过改变肿瘤的免疫反应、改善预后和总生率从而发送癌症患者的临床结果。本回顾性研究旨在评估细胞因子诱导杀伤（CIK）细胞输注疗法作为辅助治疗在结直肠癌患者中的疗效。
研究纳入中国医科大学肿瘤医院（辽宁省肿瘤医院）2006年6月至2017年9月的764例结肠癌患者进行回顾性分析。所有患者以手术治疗原发性病变，并基于NCCN指南进行辅助化疗。其中，394例患者接受CIK治疗（CIK组），另外370例具有相同的人口统计学和临床特征的患者没有接受CIK细胞输注治疗（非CIK组）。对患者随访，采用卡方检验、Kaplan-Meier和Cox回归进行数据分析。
结果显示，CIK组3年和5年的总生存期分别为88.71%和83.68%，非CIK组分别为79.24%和75.3%，CIK组的总生存显著高于非CIK组（P<0.01）。在根据AJCC肿瘤分期手册第8版进行的不同分期的CRC中，Ⅰ期结肠癌患者的OS在两组间无显著差别（P=0.195）。Ⅱ~Ⅳ期结肠癌患者的OS在CIK组显著高于非CIK组，P值分别为0.001、0.033和0.008。单变量分析显示，原发性肿瘤的分化、CIK细胞治疗与OS改善显著相关。进一步的多变量生存分析显示CIK细胞治疗仍然与OS改善有关。此外，化疗联合CIK组的OS显著高于单纯化疗组（P<0.001），化疗联合CIK组的副作用低于单纯化疗组，随着整个治疗周期的延长5年OS显著提高。
结论
CIK细胞治疗改善结肠癌患者的辅助化疗的效果。仍需多中心、大样本的随机对照试验来确认这些结果。
文献来源
1. Z. Wen, et al. Differences in tumor immune microenvironment and clinical outcomes between right and left colon cancer. ESMO Virtual Congress 2020, Abstract 498P.
2. C. miao, et al. Investigating the potential relationship between KMT2C/KMT2D mutations and immune checkpoint inhibitor（ICI） in colorectal cancer（CRC）. ESMO Virtual Congress 2020, Abstract 497P.
3. C. Shi, et al. Different gene mutation of colorectal cancer was tightly associated with various types of tumor immune microenvironment. ESMO Virtual Congress 2020, Abstract 481P.
4. R. Guo, et al. Analysis of the efficacy of cytokine-induced 致命物 cell therapy in adjuvant treatment of colorectal cancer. ESMO Virtual Congress 2020, Abstract 418P.
